鑒別生理生化培養(yǎng)基 四
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
無菌成品培養(yǎng)基
鑒別生理生化培養(yǎng)基 四
成份:
將上述物質(zhì)混勻調(diào)PH7.6后加1.2%酚紅0.4毫升
制法:將下層配好,分裝中號試管(1毫升),塞好包扎,15磅高壓滅菌半小時,使凝固后備用.
制上層時,先將蛋白胨水制好,加入硫酸亞鐵,硫代硫酸鈉,加熱溶解PH8.1,再加入酚紅分瓶,(每瓶300毫升,稱取瓊脂包扎滅菌,趁熱加入乳糖隔水煮沸30分鐘或112攝氏度消毒15分鐘).
取已制的下層管,每管用無菌法倒入上層液約1.5毫升,邊斜放置使成斜面,凝固后備用.
標準:無菌試驗合格,接種大腸桿菌下層產(chǎn)酸產(chǎn)氣,上層產(chǎn)酸.
酪素培養(yǎng)基
干酪素4.0g,瓊脂20g,用0.1mol/L的磷酸緩沖液配制成1000毫升,121攝氏度高溫高壓滅菌30分鐘,備用;
V.P.試驗
培養(yǎng)基:蛋白胨5g,葡萄糖5g,NaCl5g,蒸餾水1000毫升.調(diào)節(jié)pH6.5,每管分裝4-5毫升,0.06MPa(8lbf/in2)30分鐘滅菌.
試劑:40%NaOH,肌酸.
培養(yǎng)基:(NH4)2HPO41g,MgSO4?7H2O0.2g,KCl0.2g,酵母膏0.2g,糖或醇類10g,水洗瓊脂5-6g,蒸餾水1000毫升,0.04%溴甲酚紫乙醇液20毫升.
在加入指示劑前先調(diào)節(jié)pH為7.0,然后加入指示劑,分裝試管,培養(yǎng)基高度約為4-5cm,0.06MPa(8lbf/in2)30分鐘滅菌(不擺斜面).
芽孢桿菌鑒定須測定的糖類包括D-葡萄糖,L-阿拉伯糖,D-木糖和D-甘露醇.
酪素水解
培養(yǎng)基:取50毫升的脫脂牛奶(或取5g脫脂奶粉加入到50毫升的蒸餾水中)放入1只三角瓶中,另稱1.5g瓊脂置于含50毫升蒸餾水的另1只三角瓶中,然后將兩液分開滅菌,0.06MPa(8lbf/in2)20分鐘,待冷至45-50攝氏度時,速將兩液混勻倒平板,即成牛奶平板.將平板倒置過夜,使表面水分干燥.
明膠水解
培養(yǎng)基:明膠120g,蒸餾水1000毫升調(diào)節(jié)pH7.0,分裝試管,培養(yǎng)基高度約為4-5cm,0.06MPa(8lbf/in2)30分鐘滅菌.
淀粉水解
培養(yǎng)基:在肉湯瓊脂中添加1.2%的可溶性淀粉,分裝于三角瓶,0.1MPa(15lbf/in2)20分鐘滅菌備用.
試劑:盧哥爾氏碘液
酪氨酸水解
培養(yǎng)基:將L-酪氨酸0.5g懸浮于10毫升蒸餾水中,0.06MPa(8lbf/in2)30分鐘滅菌.然后與100毫升無菌的肉湯瓊脂混合,倒10個小平板(直徑6cm).
檸檬酸鹽的利用
培養(yǎng)基:檸檬酸鹽瓊脂36g,蒸餾水1000毫升,加熱溶解后,調(diào)節(jié)pH為6.8,分裝試管,0.1MPa(15lbf/in2)20分鐘滅菌后擺成斜面.
苯丙氨酸脫氨試驗
培養(yǎng)基:酵母膏3g,Na2HPO41g,NaCl5g,DL-苯丙氨酸2g,瓊脂15g,蒸餾水1000毫升,調(diào)節(jié)pH7.3,分裝試管,0.06MPa(8lbf/in2)30分鐘滅菌,擺成斜面.
試劑:10?Cl3水溶液.
卵磷脂酶的測定
培養(yǎng)基:在無菌操作下取出卵黃,加等量的無菌生理鹽水,搖勻后,取10毫升的卵黃液加到已熔化并冷卻至約50-55攝氏度的200毫升肉湯瓊脂中,混合均勻后倒入培養(yǎng)皿內(nèi),制成卵黃平板,過夜后即可使用.
硝酸鹽還原
培養(yǎng)基:肉湯液1000毫升,KNO31g.調(diào)節(jié)pH7.0,培養(yǎng)液分裝試管,0.1MPa(15lbf/in2)20分鐘滅菌.
試劑:
格里斯氏(Griess)試劑:
A液對氨基苯磺酸0.5g,稀醋酸(10%左右)150毫升.
B液α-萘胺0.1g,蒸餾水20毫升,稀醋酸(10%左右)150毫升.
二苯胺試劑:二苯胺0.5g溶于100毫升濃硫酸中,用20毫升蒸餾水稀釋.
產(chǎn)生吲哚(靛基質(zhì))實驗
培養(yǎng)基:1%胰蛋白胨水溶液.調(diào)節(jié)pH7.5,分裝試管,每管約5毫升,0.06MPa(8lbf/in2)滅菌30分鐘.
試劑:對二甲基氨基苯甲醛5g,異戊醇75毫升,濃HCl25毫升.
從甘油產(chǎn)生二羥基丙酮
培養(yǎng)基:酵母膏10g,甘油20毫升,肉湯瓊脂1000毫升.調(diào)節(jié)pH7.2-7.4,分裝三角瓶,0.06MPa(8lbf/in2)30分鐘滅菌.
試劑:斐林氏(Fehling)試劑
A液結(jié)晶硫酸銅34.66g,用蒸餾水定容到500毫升.
B液酒石酸鉀鈉173g,NaOH50g,用蒸餾水定容到500毫升.
使用時,A液和B液等量混合,當日使用.
在pH5.7的Sabouraund葡萄糖培養(yǎng)基中生長
培養(yǎng)基:蛋白胨10g,葡萄糖20g,蒸餾水1000毫升.調(diào)節(jié)pH5.7,分裝試管,0.07MPa(8lbf/in2)30分鐘滅菌.
生長溫度的測定
培養(yǎng)基:肉湯液,調(diào)節(jié)pH7.2,分裝試管,每管約5毫升,0.1MPa(15lbf/in2)20分鐘滅菌.
耐鹽性試驗
培養(yǎng)基:5、8、10%NaCl的肉湯液.調(diào)節(jié)pH7.2,分裝試管,每管約4毫升,0.1MPa(15lbf/in2)20分鐘滅菌.
青島日水生物