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微生物培養(yǎng)基的配制用水說明

發(fā)布時(shí)間:

2022-12-27

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微生物培養(yǎng)基的配制用水

微生物污染不應(yīng)超過103 CFU/ml,最好應(yīng)低于10平方 CFU/ml
如果是氯化水,需在蒸餾前中和氯
配制用水應(yīng)儲(chǔ)存在惰性材料的容器,如玻璃
電導(dǎo)率25 μS/cm
 
培養(yǎng)基的稱重和溶解
準(zhǔn)確稱取所需的量
用正確體積的水溶解
按生產(chǎn)商說明書的條件進(jìn)行培養(yǎng)基溶解,如有些培養(yǎng)基需煮沸
注意不要吸入粉末
培養(yǎng)基體積容量與使用容器容量為1比3
對于實(shí)驗(yàn)室檢測用的培養(yǎng)基,分裝在容器里的體積最好不超過500ml
 
培養(yǎng)基的滅菌
滅菌鍋的負(fù)載和容器的大小
按生產(chǎn)商說明書的溫度和時(shí)間進(jìn)行滅菌
了解滅菌鍋的滅菌過程,包括升溫和降溫時(shí)間
了解滅菌鍋的F0值
對熱不穩(wěn)定的底物通過過濾滅菌
避免培養(yǎng)基過度受熱,造成營養(yǎng)成分降解滅菌完成后,需及時(shí)將培養(yǎng)基從滅菌鍋里取出
 
微生物培養(yǎng)基的PH調(diào)整
PH計(jì)校準(zhǔn),兩點(diǎn)或三點(diǎn)校準(zhǔn),注意培養(yǎng)基的測量值需在校準(zhǔn)點(diǎn)范圍內(nèi)
滅菌后冷卻至25°C,用PH電極測試PH值
使用溫度補(bǔ)償電極
PH值為土0.2°C在25°C
用1MNaOHor1MHCl調(diào)節(jié)PH值
按正確流程配制時(shí),- -般滅菌前是不需要調(diào)整PH
如果測試的PH值與標(biāo)準(zhǔn)值相差較大時(shí),需調(diào)查下配制過程
 
培養(yǎng)基的澆注
冷卻至約45°C倒入培養(yǎng)皿
最小厚度為3mm
90mm培養(yǎng)皿澆注18ml左右瓊脂
避免培養(yǎng)皿蓋有太多冷凝水
 
培養(yǎng)基的儲(chǔ)存
配制好的培養(yǎng)基按條件要求儲(chǔ)存在冰箱
使用前觀察培養(yǎng)基是否有顏色變化、失水或微生物生長等
 
培養(yǎng)基的溶解不完全的情況
浸泡或加熱不足
攪拌不勻
粉末培養(yǎng)基,加水后容易結(jié)塊沉淀的情況
重復(fù)融化已凝固的瓊脂培養(yǎng)基
長期在高溫下融化瓊脂培養(yǎng)基
 
培養(yǎng)基脫落/過軟情況
瓊脂不充分溶解
攪拌不勻
配制水體積和培養(yǎng)基重量不正確
長時(shí)間加熱水解或多次重復(fù)溶解瓊脂質(zhì)量